Exames

PESQUISA DE MUTAÇÃO KIT NOS EXONS 8 e 17 - LMA e Mastocitose

    Exame: PESQUISA DE MUTAÇÃO KIT NOS EXONS 8 e 17 - LMA e Mastocitose

    Preparação: sangue total

    Sobre o Exame: Nota1- Mutações no exon 17 do gene KIT contribuem para o estabelecimento diagnóstico de Mastocitose (D816V, N822K) Nota2- Mutações no exon 8 e 17 do gene KIT são encontradas na frequência de 25-35% em Leucemia Mielóide Aguda (LMA) positivas para os genes de fusão RUNX1/RUNX1T1 e CBFB-MHY11 (INV16) e, quando presentes, podem conferir prognóstico desfavorável . Entretanto, a detecção da mutação não deve ser utilizada para restratificação do grupo de risco original. Nota3- Estratificação para uso de inibidor tirosina quinase em pacientes diagnosticados com Mastocitose. Rotina: Amostras contendo o segmento de interesse (exon 8 e 17) do gene KIT são amplificadas por reação em cadeia da polimerase (DNA PCR). Após verificação da amplificação em gel de agarose, os produto de PCR de 163 pb (exon8) e 172 pb (exon17) produto são purificados por colunas GFX (GE®), segundo especificações do fabricante e quantificados em aparelho Nanodrop. A reação de sequenciamento bi-direcional é realizada utilizando-se Big Dye e a corrida eletroforética capilar realizada em plataforma 3130xl (Applied Biosystems). Eletroferogramas são analisados com o software Mutation Surveyor V3.3 (SoftGenetics LLC).