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PESQUISA DE MUTAÇÃO DIT NO GENE FLT3 - LMA

    Exame: PESQUISA DE MUTAÇÃO DIT NO GENE FLT3 - LMA

    Preparação: sangue total

    Sobre o Exame: Nota1- FLT3-DIT ocorre entre o exon 14-15 e envolve o domínio justamembrana do receptor. Nota2 - A mutação FLT3-DIT resulta na fosforilação autônoma e conseqüente ativação constitutiva do receptor FLT3, com subseqüente ativação das vias MAPK kinase e PI3K/Akt. Nota3 - A identificação e quantificação da mutação do tipo DIT, aloca o paciente portador da mutação para o grupos de risco diferenciado. Nota4- Esta metodologia não determina a proporção alelo mutado/alelo normal (taxa alélica). Entretanto pacientes com FLT3-DIT mutado (perda do alelo normal) apresentam carga alélica de FLT3 >50%. Rotina: Amostras são submetidas à reação em cadeia da polimerase (DNA-PCR) para amplificação dos exons 14 e 15 do gene FLT3. Na reação total, controles positivos, negativos e de PCR são incluídos. Os produtos de PCR são visualizados após eletroforese em gel 3% agarose e documentados através de um sistema de transiluminação. Para o fragmento selvagem (wild type ? wt) um produto de amplificação de 332pb é esperado. Fragmentos acima de 332pb são considerados sequências mutadas do tipo DIT.